在设计任何光学系统时,光学工程师需要考虑如何使用照明:具体地说,照明如何影响图像的创建方式。如果没有仔细设计,一些照明系统可能会产生一种渐晕,在这种情况下,照明在中心具有更高的强度,而在边缘周围则降低到零。或者,就像用卤素灯泡照明的简单显微镜一样,显微镜可以产生灯泡本身的图像。
在显微镜设计的情况下,光学工程师的目标应该是整个样品的均匀照明。均匀照明具有创建更高对比度的额外优势。创建这种照明的一种方法是使用所谓的科勒照明系统. 要创建Koehler照明设置,我们需要两个可调光圈:一个靠近光源(也称为聚光光圈或CD),另一个靠近样品(也称为场光圈)。
通过调整聚光光阑,光学工程师可以修改样品对比度和景深。此外,我们可以控制到达样品的光量。聚光镜在放置光圈的位置投射灯丝的较大图像。通过控制CD的光圈,我们可以控制光锥的角光圈。现场冷凝器(FD)可以控制样品上的照明区域。
由于光源未聚焦在样本上,因此灯光的行为类似于扩展漫射光源。两个膜片的孔径组合决定了显微镜系统的数值孔径。随着CD的增加,NA也会增加,从而在系统上产生更高的分辨率。
下图显示了此Koehler布局在实践中的外观。